پویاژن آزما یک شرکت دانش بنیان و آزمایشگاه معتبر همکار سازمان غذا و دارو میباشد. این شرکت کارآموزی دو روزه PCR برگزار میکند. کارآموزی PCR برای کسانی که میخواهند انواع تست PCR را بطور کامل یاد بگیرند در مدت زمان کم به نتیجه مناسبی دست یافته و رزومه خود را ارتقا دهند، مناسب است. شما در این کارآموزی ابتدا مباحث تئوری را بطور کامل یاد میگیرید و سپس تحت نظر کارشناس بطور کاملا عملی تکنیک ها را خودتان انجام میدهید تا هر اشکالی وجود دارد گرفته شود و در نهایت تا زمان تسلط کامل مراحل را تمرین میکنید.
همچنین شما تمامی نتایج را تحلیل میکنید و ترابل شوتینگ تست ها (بررسی خطاها) را بطور کامل یاد میگیرید تا بدانید در زمان بروز هر مشکل و خطایی باید چکاری انجام دهید.
شما بعد از اتمام دوره نیز، اگر به مشکلی برخورد کردید میتوانید از پشتیبانی ما استفاده کنید.
برای آموزش های حضوری و کارآموزی میکروبیولوژی و کارآموزی مهندسی ژنتیک یعنی انجام دادن تمام تکنیک های میکروبی و مولکولی توسط خودتان میتوانید با ما تماس بگیرید.
09101438051 / 02140443676
از دیدگاه های متفاوت می توان دسته بندی های متفاوتی برای PCR انجام داد. بر اساس نوع تکنولوژی مورد استفاده می توان PCR را به سه دسته تقسیم کرد. شرکت دانش بنیان پویاژن آزما تولید کننده کیت های استخراج DNA و دارای آزمایشگاه تحقیقاتی مجهز، در این مقاله به انواع تست PCR، ساز و کار PCR ، دسته بندی PCR بر اساس نوع تکنولوژی و نوع آنالیز آنها می پردازد.
یکی از خدماتی که شرکت پویاژن آزما انجام میدهد انجام تست PCR میباشد که به همین منظور کارآموزی هایی بصورت نیمه خصوصی برای تدریس کامل این تکنیک و هر آنچه برای انجام آن نیاز دارید، برگزار میکند. به این صورت که ابتدا هر کارآموزی هر مبحث را بصورت کامل توسط کادر مجرب آموزش میبیند؛ پس از آموزش، تحت نظر کارشناس تمامی بخش ها را انجام میدهد و رفع اشکال انجام میشود. علاوه بر این تمامی تحلیل ها و بررسی خطاهای احتمالی حین کار به شما آموزش داده خواهد شد.
اگر نیاز به تقویت رزومه خود دارید و میخواهید بر تکنیک ها تسلط مناسبی پیدا کنید تا هم به تنهایی بتوانید تکنیک ها را انجام دهید (برای پایان نامه و یا هر پروژه ای) و هم بتوانید در هر مصاحبه ای سوالات تخصصی تکنیک ها را پاسخ دهید، میتوانید در دوره های مختلف شرکت پویاژن آزما شرکت کنید.
سرفصل های این دوره شامل:
- اصول زیستی و ایمنی آزمایشگاه سلولی و مولکولی
- آشنایی و آموزش نحوه استفاده از تجهیزات آزمایشگاهی
- بافرسازی و نحوه محاسبات
- طراحی پرایمر
- استخراج DNA
- بررسی کمی و کیفی ژنوم استخراج شده
- PCR
- الکتروفورز ژل آگارز و تحلیل کامل نتایج و بررسی انواع خطای احتمالی
این دوره در دو روز کامل کاری برگزار میشود و قیمت آن یک میلیون و 600 هزار تومان میباشد که شما میتوانید از تخفیفات متنوعی که در بخش آموزش و کارآموزی آمده استفاده کنید.
اگر زمان بیشتری برای تقویت رزومه خود دارید و میخواهید در مدت زمان بیشتری بر تکنیک ها مسلط شوید بقیه کارآموزی ها را مشاهده کنید.
برای اطلاعات بیشتر و ثبت نام میتوانید فرم موجود در صفحه آموزش پویاژن را پر کنید تا با شما تماس بگیریم و یا از طریق شماره تماس زیر با ما تماس بگیرید.
09101438051
02140443676-7
ساز و کار PCR
همانطور که در مقاله اصول و پروتکل PCR (لینک اصول و پروتکل) توضیح دادیم دستگاه ترموسایکلر چند سیکل دماهایی را تکرار میکند تا شما تعداد زیادی از ژن هدف داشته باشید. شاید تصور کنید در هر سیکل میزان ژن دوبرابر شده و نمودار آن بصورت لگاریتمی بالا می رود. اما اینگونه نیست؛ بعد از سیکل 30 تا 35 این نمودار افقی شده و تعداد ژن هدف افزایش پیدا نمی کند که به آن فاز ثابت یا plateau میگویند. دلیل آن پایان یافتن مواد واکنش مثل نوکلئوتیدهاست. به همین دلیل ما حدود 30 تا 35 سیکل واکنش را ادامه می دهیم تا بیشترین میزان از ژن را به دست بیاوریم.
در ادامه مقاله انواع تست PCR و نحوه آنالیز آن با معرفی انواع PCR خدمت شما هستیم .
انواع PCR
تمامی تکنیک های PCR اساس و سازوکار یکسانی دارند. از نظر تکنولوژی مورد استفاده می توان انواع تست PCR را به سه دسته تقسیم کرد:
- End point PCR
- Quantitative PCR
- Digital PCR
End point PCR :
همان PCR معمولی و رایج است که برای اکثر کارهای مولکولی مثل مهندسی ژنتیک و کلونینگ استفاده می شود. که توضیحات کامل تر را از اینجا مطالعه کنید. همچنین درباره تاریخچه ایجاد تکنیک PCR می توانید از اینجا مطالعه کنید.
آنالیز آن با الکتروفورز ژل آگارز انجام می شود. در تصویر ژل الکتروفورز اندازه و کیفیت باندها را مشاهده می کنید. محصول این واکنش برای کلونینگ، تعیین توالی، ژنوتایپینگ و ردیابی توالی خاص استفاده می شود. در این روش نمی توانید به صورت کمی میزان ژن را مشخص کنید و فقط بر اساس پر رنگ و کمرنگ بودن باندها میتوانید تفاوت غلظت را مشاهده کنید.
تصویری از یک ژل آگارز با باندهایی با اندازه های متفاوت (مارکر) و تمیز
Quantitative PCR :
در qPCR شما بصورت کمی میزان وجود یک ژن یا RNA آن را مشخص می کنید. مقدار محصول با استفاده از یک نشانگر (prob) و یا رنگ فلورسنت (برای مثال سایبرگرین) را مشخص کرده بصورت کمی مشخص می شود. به این صورت که سیگنال فلورسنت با افزایش سنتز در دستگاه افزایش یافته و به این صورت می توانیم تغییرات بیان و میزان بیان را مشخص کنیم.
با رسم نمودار استاندارد کارایی این روش را مشخص کرده و میزان بیان هر ژن را اندازه گیری کرد.
نمودارثبت دما های موردنظر به دستگاه ترموسایکلر (PCR) شرکت Biorad
این نوع PCR برای بررسی میزان RNA (بیان ژن)، تفاوت تعداد کپی، تشخیص مولکولی و ژنوتایپینگ استفاده می شود.
Digital PCR :
این نوع PCR ابزار دقیقی برای بررسی تنوع ژنی است. بر اساس رفرنس و منابعی که به آن داده شده تعداد دقیق محصول را مشخص می کند.
در ادامه مقاله انواع تست PCR و نحوه آنالیز آن به انواع PCR از نظر کاربرد آن می پردازیم .
انواع PCR بر اساس کاربرد :
Real-Time PCR (PCR کمی یا qPCR)
در این روش مولکول های DNA با استفاده از رنگ فلورسنت، برای نظارت و تعیین کمی محصولات ریل تایم PCR نشان گذاری می شوند.
Reverse-Transcriptase (RT – PCR)
DNA مکمل (cDNA) توسط آنزیم reverse transcriptase با رونویسی معکوس RNA به DNA تهیه می شود.
reverse transcriptase Multiplex PCR
از چندین پرایمر برای ایجاد چندین قطعه ژن در یک نمونه PCR استفاده می کند.
Nested PCR
پس از چرخه 25 الی 35 PCR ، یک PCR اضافی با استفاده از پرایمرهای جدید بصورت “تو در تو” (nested) انجام می شود تا احتمال محصولات ناخواسته غیراختصاصی را کاهش دهد.
Hot Start PCR
در آن از گرما برای ازبین بردن ساختار آنتی بادی هایی استفاده می شود که برای غیرفعال سازی Taq polymerase PCR استفاده شده. توضیحات کامل تر در مورد این روش را در لینک مربوط به هات استارت می توانید بخوانید.
Long-range PCR
DNA هایی با اندازه بزرگ را با استفاده از مخلوطی از چند پلیمراز تکثیر کرد.
Assembly PCR
قطعات DNA طولانی با استفاده از پرایمرهای مختلف که باهم همپوشانی دارند تکثیر می شوند.
Asymmetric PCR
فقط یک رشته DNA هدف در PCR سنتز می شود.
In situ PCR
PCR که در سلول ها یا در بافت ثابت شده روی لام اتفاق می افتد.
سوالات متداول در مورد تکنیک PCR
از کجا بفهمم کدام آنزیم DNA Polymerase برای کار من مناسب است؟
آنزیم DNA Polymerase دارای 4 ویژگی خاص و مهم است که شما باید با توجه به هدف تحقیق، نوع مناسب خود را از این میان انتخاب نمایید. این 4 ویژگی در لینک رو به رو به تفصیل توضیح داده شده اند: انتخاب DNA پلیمراز مناسب
تکنیک PCR را می دانم، اما در مورد تنظیمات دستگاه مطمئن نیستم؟
هر تکنیکی دارای یک پروتکل مشخص است، با مشاهده ی لینک زیر، می توانید کلیاتی از کارکرد دستگاه یاد گرفته و با توجه به ژن و پرایمرهای خود، دستگاه را برای استفاده تنظیم کنید.
چگونه برای یک ژن خاص پرایمر طراحی کنم؟
پرایمرها باید به گونه ای طراحی شوند که مکمل رشته الگو DNA باشند. در لینک زیر آموزش طراحی پرایمر به صورت کامل و رایگان آورده شده است:
با تشکر از همراهان گرامی پویاژن آزما . امیدواریم مقاله انواع تست PCR و نحوه آنالیز آن مفید واقع شده باشد .
منابعی برای مطالعه درباره انواع تست PCR و نحوه آنالیز آن: منبع اول منبع دوم منبع سوم
