پویاژن آزما

رنگ آمیزی کپسول

رنگ آمیزی کپسول

برای کار در آزمایشگاه میکروبیولوژی میکروارگانیسم ها را بصورت زده و مرده (رنگ آمیزی شده) با استفاده از میکروسکوپ مشاهده می کنیم. در مقالات قبل درباره مشاهده باکتری ها بصورت زنده توضیح داده شد. همچنین میتوانید درباره انواع محیط کشت و نحوه جداسازی میکروارگانیسم ها از محیط های مختلف مطالعه کنید. در این مقاله آزمایشگاه همکار غذا و دارو، پویاژن آزما تولید کننده انواع کیت استخراج DNA و محصولات بیوتکنولوژی، تلاش کرده تا روش مشاهده میکروارگانیسم های اسپوردار با رنگ آمیزی اسپور آموزش دهد.

برای آموزش های حضوری و کارآموزی میکروبیولوژی و کارآموزی مهندسی ژنتیک یعنی انجام دادن تمام تکنیک های میکروبی و مولکولی توسط خودتان میتوانید با ما تماس بگیرید. 

09101438051
021404436-7

کیت استخراج DNA از باکتری تولیدی پویا ژن آزما از سخت ترین نمونه های باکتری مانند استافیلوکوکوس اورئوس با کیفیت بالا استخراج کرده و نتایج PCR و تعیین سکانس عالی خواهید داشت. با به صرفه ترین قیمت و بیشترین کیفیت.

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

رنگ آميزي كپسول

اهداف:

آشنا سازي دانشجو با:

1ـ اساس شيميايي رنگ آميزي كپسول.

2ـ انجام روشي براي تمايز بين مواد كپسولي ازسلول باكتريايي.

کپسول چیست؟

كپسول يك لايه ژلاتيني خارجي است كه از سلول ترشح شده وآنرا احاطه كرده وبه ديواره سلولي متصل است. تمامي ميكرو ارگانيسمها قادر به توليد كپسول نمي باشند. سلولهايي كه كپسول ضخيمي دارند عموما بيماريزا بوده وقادرند به كمك آن از گزند فاگوستيوز سلولهاي ميزبان در امان باشند.

از نظر شيميايي جنس كپسول متفاوت است جنس آن مي تواند پلي ساكاريدي، گليكوپروتئيني ، پلي پپتيدي ويا سلولزي باشد.روش رنگ آميزي كپسول نسبت به سايررنگ آميزيها ي افتراقي مشكلتر است چرا كه مواد تشكيل دهنده كپسول در آب محلول هستند و ممكن است در زمان شستشو از روي لام كنده شوند. حرارت باعث منقبض شدن سلول شده و ممكن است هاله شفافي در اطراف سلول ايجاد كند، دراين صورت حالتي ايجا د مي شود كه ممكن است با كپسول اشتباه شود.

کپسول باکتری

تصویر شماتیک از ساختار باکتری و محل قرارگیری اجزا از جمله کپسول

 

از جمله روش هاي رنگ آميزي كپسول مي توان به روش آنتونی ، هیس _ جونز و مركب چين يا نيگروزين اشاره كرد.

روش آنتونی برای رنگ آمیزی کپسول

رنگ اوليه

بدون هيچگونه حرارتي رنگ كريستال ويوله به گسترش اضافه مي شود كه در نتيجه آن سلول وكپسول هردوبنفش مي شوند.

عامل رنگ بر و رنگ متضاد

بدليل غير يوني بودن كپسول باكتري،رنگ اوليه به آن هيچ پيوندي نمي دهد. با وجوديكه كپسول يك تركيب محلول درآب است ولي حلاليت سولفات مس درآن بيشتراست. با افزودن اين معرف،رنگ بنفش جذب شده در كپسول خارج ميشود بدون آنكه رنگ متصل به ديواره سلولي را حذف كند به اين ترتيب سولفات مس بعنوان يك رنگ زمينه عمل كرده و جذب كپسول بي رنگ مي شود. دراين روش كپسول به هاله روشن یا صورتی روشن و سلول باكتري به رنگ بنفش ديده مي شود.

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

پروتکل رنگ آمیزی کپسول به روش آنتونی

تهيه گسترش از باكتري كپسول دار.

خشك كردن در مجاورت هوا ( بدون عمل فيكسا سيون با حرارت).

3ـ افزودن كريستال  ويوله  به مدت 7-4 دقيقه(a).

شستشوي لام با سولفات مس 20%(b).

خشک کردن لام با کاغذ کاذب و یا در جریان هوای ملایم(c).

 

پروتکل رنگ آمیزی کپسول

رنگ آمیزی کپسول با روش آنتونی

 

  دراين روش كپسول باكتري به صورت هاله شفاف وجسم رويشي باكتري به رنگ بنفش ديده مي شود.

رنگ آمیزی کپسول

نمونه ای با رنگ آمیزی کپسول با روش آنتونی. کپسول بصورت هاله شفاف در اطراف باکتری به رنگ بنفش مشاهده می گردد

 

پرتکل رنگ آمیزی کپسول به روش جونز

تهيه گسترش از باكتري كپسول دار.

خشك كردن در مجاورت هوا ( بدون عمل فيكسا سيون)

3ـ افزودن كريستال  ويوله 2% بمدت 1- 0/5 دقيقه

شستشوي آرام با جريان آب.

5 ـ افزودن محلول اسيد استيك 2-1% ( بمدت 10 ثانيه)

شستشو با جريان آرام آب

    دراين روش كپسول باكتري به رنگ صورتي كم رنگ وجسم رويشي باكتري به رنگ بنفش ديده مي شود .

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

رنگ آمیزی کپسول به روش مركب چين ( نيگروزين )

  اين نوع رنگ آميزي به دوروش زير صورت مي گيرد.

الف) گسترش مرطوب با مركب چين (  Wet india ink method  ) .

قطره اي از مركب چين (يا نيگروزين )روي لام قرار دهيد.

يك لوپ پر از باكتري مورد نظربا آن مخلوط كنيد .

3 ـ يك لامل تميز روي آن قرارداده و به آرا مي بفشاريد.

مشاهده ميكروسكپي باعدسي 100

در اين حالت بين ديواره باكتري و زمينه سياه روي لام ، با عمل ميكرومتري ميكروسكپ هاله شفاف روشني ديده مي شود كه كپسول باكتري است .

ب ) گسترش خشك با مركب چين( روش گراهام و ایوانز).

پروتکل رنگ آمیزی کپسول

  • يك لوپ پراز باكتري مورد نظر را دريكي ازدو انتهاي لام قرار دهيد.
  • يك قطره مركب چين (يا نيگروزين ) به آن اضافه كرده مخلوط كنيد .
  • به كمك يك لام ديگر نمونه را روي لام اول بگسترانيد(شبيه روش رنگ آميزي منفي) .
  • چند قطره الكل متيليك جهت فيكساسيون نمونه اضافه كنيد.
  • رنگ كريستال ويوله (2-1 دقيقه) اضافه كنيد.
  • گسترش را با جريان ملايم آب بشوييد.
  • نمونه را خشك كرده ، زيرميكروسكپ با عدسي 100 بررسي كنيد.

دراين روش سلول باكتري به رنگ بنفش ، زمينه لام سياه رنگ وكپسول باكتري بصورت هاله شفاف يا صورتي كم رنگ ديده خواهد شد.

برای آموزش های حضوری و کارآموزی میکروبیولوژی و مولکولی یعنی انجام دادن تمام تکنیک ها توسط خودتان میتوانید با ما تماس بگیرید.

09101438051
021404436-7

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

امیدواریم این مقاله برای شما مفید بوده و انواع کشت باکتری را یاد گرفته باشید. در ادامه به آموزش رنگ آمیزی فلاژل میپردازیم. همچنین میتوانید پروتکل رنگ آمیزی اسپور را نیز مطالعه کنید. اگر به میکروبیولوژی صنعتی علاقمندید میتوانید درباره نحوه انتخاب سویه های باکتری برای صنعت نیز مطالعه کنید.

همچنین این شرکت دانش بنیان تولید کننده انواع سیستم تصفیه آب صنعتی بر پایه بیوفیلتر میباشد.

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد. بخش‌های موردنیاز علامت‌گذاری شده‌اند *

منوی دسته بندی های خود را در تنظیمات قالب -> هدر -> منو -> منو موبایل (دسته ها) تنظیم کنید
اولین منوی خود را اینجا ایجاد کنید
سبد خرید
فروشگاه
لیست علاقه مندی ها
0 مورد سبد خرید
حساب من