تخلیص ژل الکتروفورز
معمولا برای مشاهده باندهای DNA در آزمایشاتی نظیر PCR و استخراج ژنوم یا پلاسمید، از تکنیک الکتروفورز آگارز استفاده می شود. به منظور انجام تست هایی نظیر برش پلاسمید یا محصول PCR با آنزیم های محدود کننده، یا جداسازی یک باند خاص PCR از یک نمونه به صورت خالص نمونه روی ژل ران شده و بعد همان قسمت باند مورد نظر زیر اشعه UV با وسایلی مثل اسکالپل یا تیغ بریده می شود. می توان این ترکیب ژل-DNA را دوباره دورن بافر های خاصی حل کرد و DNA مورد نظر را به این وسیله خالص سازی کرد. این تکنیک در آزمایش های ملکولی مختلفی نظیر کلونینگ، تعیین سکانس، هضم آنزیمی و … کاربرد دارد.
شرکت دانش بنیان پویاژن آزما با تکیه بر دانش متخصصان و کارشناسان مجرب خود، بافرهای تخلیص DNA از روی ژل را بهینه سازی و درون کیت های آماده مصرف تولید کرده است. کیت شرکت ما با داشتن بافرهای با کیفیت و همچنین ستون های مناسب و قوی، بیشترین میزان تخلیص ممکن را به شما ارائه خواهد کرد.
روش کار این کیت بسیار آسان بوده و در زمانی کمتر از 20 دقیقه قابل انجام خواهد بود.
پروتکل تخلیص ژل
1. میکروتیوب خالی را وزن کرده، سپس ژل بریده شده را داخل آن بگذارید. دوباره میکروتیوب را وزن کنید. اختلاف این دو عدد را یادداشت کنید.
2. سه برابر عدد به دست آمده بر حسب میلی گرم را بافر GB بر حسب میکرولیتر بریزید. میکروتیوب را درون حمام آب C˚55 می گذاریم تا زمانی که ژل کاملا درون بافر حل شود.
3. کل مایع را به ستون منتقل کنید(اگر میزان بیشتر از l800µ بود طی دو بار این کار را انجام دهید.)
4. به مدت 1 دقیقه با دور 13000 میکروفیوژ کنید. مایع زیرین را دور بریزید.
5. L700µ بافر NW به روی ستون بریزید.
6. به مدت 1 دقیقه با دور 13000 میکروفیوژ کنید. مایع زیرین را دور بریزید.
7. جهت حذف کامل بافر از ستون 1 دقیقه اضافه تر میکروفیوژ کنید.
8. تیوب ستون را حذف و ستون را به میکروتیوب جدید منتقل کنید
9. L30µ بافر EB یا آب مقطر دو بار تقطیر به مرکز فیلتر ستون بریزید.
10. 2-3 دقیقه در دمای اتاق نگه داری کنید(در ستون را ببندید تا بافر تبخیر نشود.)
11. به مدت 1 دقیقه با دور 13000 میکروفیوژ کنید. مایع به دست آمده حاوی DNA تخلیص شده می باشد.
12. DNA به دست آمده را می توانید برای واکنش های بعدی استفاده کنید. در صورت نیاز به نگه داری آن را در فریزر منفی 20 درجه سانتی گراد نگه دارید.
نقد و بررسی‌ها
هنوز بررسی‌ای ثبت نشده است.