پروتکل های IMCiV

پروتکل تست IMViC

شناسایی باکتری های روده ای مهمترین مرحله در شناسایی بیماری های با منشا غذا و آب می باشد. تعدادی از باکتری هایی که در روده انسان و حیوانات دیگر یافت می گردند متعلق به خانواده انتروباکتریاسه آ هستند. این باکتری ها کوتاه، گرم منفی، میله ای بدون اسپر هستند. این باکتریها را می توان به تخمیر کننده ها و غیر تخمیر کننده های لاکتوز تقسیم کرد.

بیماریزاها مانند سالمونلا و شیگلا (غیر تخمیر کننده لاکتوز) ، بیماریزاهای اتفاقی مانند کلبسیلا و اشریشیا (تخمیر کننده لاکتوز) و پروتئوس (غیر تخمیر کننده لاکتوز.) تشخیص و افتراق بین این باکتریها را می توان بوسیله استفاده از تست IMViC (اندول ، متیل رد ، VPو سیترات) انجام داد. در مقاله قبل توضیحات کامل درباره این مجموعه تست آورده شد، در این مقاله آزمایشگاه همکار غذا و دارو پویاژن آزما قصد دارد بطور مفصل به توضیح پروتکل تست IMViC بپردازد.

اگر مایلید تست های میکروبی و مهندسی ژنتیک را آموزش ببینید و خودتان انجام دهید به صفحه کارآموزی مهندسی ژنتیک و کارآموزی میکروبیولوژی سر بزنید یا با ما تماس بگیرید.

09101438051

02140443676

پروتکل آزمایش تولید اندول

مرحله اول تست اندول

1- نام خود، تاریخ و نام هر باکتری که قرار است کشت داده شود (باکتریهای اشریشیاکلی ، پروتئوس ولگاریس و انتروباکتر آئروژنز) را بر روی هر لوله SIMبنویسید. (اگر محیط SIMدر دسترس نبود محیط TSB جهت آزمایش تولید اندول مناسب است.)

2- بصورت استریل هر لوله را با سوزن کشت بصورت عمقی کشت دهید.

3- لوله ها را به مدت 24 ساعت در 35 درجه قرار دهید.

مرحله دوم تست اندول

1- در حالیکه دستکش در دست دارید ( 5/0ml حدود 10 قطره) معرف کواکس به هر لوله اضافه کنید و به آرامی هم زنید. رنگ قرمز پر رنگ در حضور اندول ظاهر می گردد. نمونه های منفی بدون رنگ باقی مانده و یا زرد روشن می شوند.

2- بر اساس مشاهدات خود نتایج را یادداشت کنید.

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

پروتکل آزمایش متیل رد

مرحله اول تست متیل رد

1- نام خود، تاریخ و نام هر باکتری که قرار است کشت داده شود(باکتریهای اشریشیاکلی ، انتروباکتر آئروژنزو کلبسیلا اکسی توکا) را بر روی هر لوله MR-VP بنویسید.

2- هر لوله را با میزان مناسبی از باکتری با استفاده از لوپ کشت دهید.

3- لوله ها را به مدت 24-48 ساعت در 35 درجه قرار دهید. در مورد باکتری هایی که به آرامی تخمیر انجام می دهند ممکن است 4-5 روز لازم باشد.

مرحله دوم تست متیل رد

1- جهت بررسی 3/1 ، VP از محیط هر لوله را به لوله آزمایش خالی دیگری انتقال دهید.

2- به 3/2 باقی مانده ( 0.2ml حدود 5-4 قطره) از معرف متیل رد اضافه کنید و سپس تغییر رنگ را یادداشت کنید( رنگ قرمز مثبت است).

پروتکل آزمایش voges – proskauer

1- در حالیکه دستکش در دست دارید، 6/0 ml از محلول A باریت و 2/0 mlاز محلول B باریت را به هر کدام از لوله ها ( 3/1 جدا شده) اضافه کنید و به شدت به نحوی که هوا به آن برسد هم بزنید. واکنش مثبت سریع یا در خلال 41دقیقه رخ داده و با ایجاد رنگ قرمز مشخص می گردد.

2- نتایج را بر اساس مشاهدات خود یادداشت کنید.

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

پروتکل آزمایش مصرف سیترات

مرحله اول تست سیترات

1- نام خود، تاریخ و نام هر باکتری که قرار است کشت داده شود(باکتریهای اشریشیاکلی ، انتروباکتر آئروژنز و کلبسیلا اکسی توکا) را بر روی هر لوله حاوی محیط شیب دار سیمون سیترات آگار بنویسید.

2- بصورت استریل هر لوله را با باکتری مربوطه بصورت سطحی و عمقی کشت دهید.

3- لوله را مدت 24-48 ساعت در 35 درجه قرار دهید.

مرحله دوم تست سیترات

1- هر لوله را از نظر رشد و تغییر رنگ از سبز به آبی بررسی کنید.

2- بر اساس مشاهدات خود نتایج را یادداشت کنید. مشخص کنید که کدام باکتری قادر به مصرف سیترات میباشد. ایجاد رنگ آبی نشان دهنده مثبت می باشد.

نکات لازم

1- لوله های SIM را فقط 24 ساعت قبل از اضافه کردن معرف کواکس انکوبه کنید زیرا ممکن است اندول در اثر انکوباسیون طولانی متابولیزه گردد که این باعث نتیجه منفی کاذب در مورد بعضی از باکتریهایی که تولید کننده اندول از تریپتوفان هستند، شود.

2- آزمایش تولید اندول را می توان با اضافه کردن معرف کواکس به محیط TSB نیز انجام داد.

3- بیشتر از 5 قطره از متیل رد اضافه نکنید. بیشتر از آن ممکن است باعث ایجاد رنگ قرمز بدون ارتباط با محصولات نهایی متابولیکی اختصاصی گردد.
در زیر جداول مناسب یادداشت نتایج آزمایشات آمده است.

جدول ثبت نتایج آزمایش اندول

جدول ثبت نتایج MR-VP

جدول ثبت نایج آزمایش مصرف سیترات

برای آموزش های حضوری و کارآموزی میکروبیولوژی و مولکولی یعنی انجام دادن تمام تکنیک ها توسط خودتان میتوانید با ما تماس بگیرید.

09101438051
021404436-7

برای خرید کیت استخراج DNA از انواع نمونه ها و محصولات مولکولی کلیک کنید.

امیدواریم این مقاله برای شما مفید بوده، همچنین میتوانید درباره نکات کار در آزمایشگاه میکروبیولوژی مطالعه کنید و اگر به این مبحث علاقمند هستید میتوانید از این لینک به زبان انگلیسی درباره آنزیم بتاگالاکتوزیداز مطالعه کنید.

همچنین این شرکت دانش بنیان تولید کننده انواع سیستم تصفیه آب صنعتی بر پایه بیوفیلتر میباشد.

دیدگاهتان را بنویسید

نشانی ایمیل شما منتشر نخواهد شد.

منوی دسته بندی های خود را در تنظیمات قالب -> هدر -> منو -> منو موبایل (دسته ها) تنظیم کنید
اولین منوی خود را اینجا ایجاد کنید
سبد خرید
برای دیدن نوشته هایی که دنبال آن هستید تایپ کنید.
فروشگاه
لیست علاقه مندی ها
0 مورد سبد خرید
حساب من